可溶性包涵体蛋白复性（物理透析）试剂盒产品说明书

可溶性包涵体蛋白复性（物理透析）试剂是一种旨在使用物理透析方法，使可溶性变性纯化蛋白重新折叠，恢复其蛋白功能和活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种可溶性纯化蛋白，尤其是细菌内重组蛋白（融合蛋白）以及可溶性处理的包涵体蛋白。可后续用于蛋白功能、酶活性等分析。产品即到即用，性能稳定，参数优化，操作便捷，复性效果理想。

技术背景:

在蛋白纯化和融化过程中，特别是包涵体蛋白，变性剂（denaturant）提供了最有效的手段，其获得的纯化蛋白属于变性蛋白（denatured protein）。为了使变性蛋白恢复为天然蛋白（native protein），即具有蛋白质的自然结构和活性，需要进行蛋白复性（renaturation）或重新折叠（refolding）。蛋白复性是一个复杂的过程，诸如pH、离子强度、低分子添加剂、氧化还原电位（redox potential）和温度等物化因子，影响体外蛋白复性的效率。通常体外复性的方法包括稀释法和缓冲交换法。前者通过化学处理，而后者采用物理方法（例如透析、膜过滤（diafiltration）、凝胶过滤层析（gel-filtration chromatography）等，以达到蛋白复性的效果。物理透析具有自然复性，减少化学干扰。

透析液（Reagent A）           毫升
透析袋                                个

产品说明书                          1 份

保存方式:

保存在4℃冰箱里， 避免光照，有效保证3 月

2 升烧杯：用于样品保存的容器
4℃冰箱：用于反应孵育

1． 准备好可溶性纯化变性蛋白样品
2．（选择步骤）加入适量的透析液（Reagent A）调整蛋白浓度到1 毫克/毫升
3． 移取xx 毫升蛋白样品到透析袋或自备透析袋（注意：确保封闭，没有渗漏）
4． 放入2 升烧杯中
5． 加入xx 毫升透析液（Reagent A）
6． 放进4℃环境中，磁力搅拌16 小时（注意：4 小时后可以更换一次透析液）
7． 收集样品（注意：用户可以使用新鲜的透析液（Reagent A）或自备蛋白稀释液进行稀释处理）
8． （选择步骤）移取100 微升进行生物检测，例如蛋白功能或活性：比色法、HPLC、受体结合实验等确
定复性蛋白活性值
9． 即刻放进－70℃冰箱里保存

1． 本产品为1 次（10 毫升样品）操作
2． 操作时须戴手套
3． 本产品的复性效率达80％
4． 建议与本公司系列包涵体蛋白溶解试剂盒配套使用
5． 透析袋使用前，置于60℃无离子水浸泡10 分钟后，方可使用
6． 如果蛋白样品在室温下较为稳定，且活性不受影响，可以使用室温下透析处理，效果（产率和可溶性）更佳
7． 由于样品的特异性，用户可以优化温度（4 度或室温）、孵育时间（4 小时至16 小时）、蛋白容量（5至15 毫升），以获得最大复性效率
8． 透析袋为3.5Kd 临界值
9． 本公司提供系列包涵体蛋白处理试剂产品

1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定无蛋白酶污染