LBA4404农杆菌感受态细胞

储存条件：-70 ℃ 保存，避免反复冻融

LBA4404 农杆菌感受态细胞具有链霉素和利福平抗性，适用于玉米、烟草等植物的转基因操作，转化效率高达 10³cfu/μg。

操作方法

1. 取 -80℃保存的农杆菌感受态于冰上或室温融化。
2. 每 100uL 感受态加 1ug 质粒 DNA 混匀，依次于冰上静置 10 分钟、液氮 5 分钟、37℃ 5 分钟、冰浴5 分钟。
3. 加入 700uL 无抗生素的 2YT 或 LB 液体培养基，于28℃振荡培养 2~3 小时。
4. 5000rpm 离心 1 分钟收菌，留取 100uL 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 2YT或 LB 平板上，倒置放于 28℃培养箱培养 2-3 天。

注意事项

 1. 感受态细胞最好在冰上融化。 

 2. 混入质粒时应轻柔操作。 
 3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。